本文作者:jdkaghai

脱色摇床脱色摇床(脱色摇床的操作使用及维护保养)

jdkaghai 07-29 19
脱色摇床脱色摇床(脱色摇床的操作使用及维护保养)摘要: 蛋白染色剂怎么用?蛋白染色剂怎么用?步骤/方式1蛋白质染色剂的操作方式:  1.洗涤PAGE电泳胶:去离子水洗涤3次,每次约5min。  电泳结束后,取胶放入约200ml去离子水中...
  1. 蛋白染色剂怎么用?

蛋白染色剂怎么用?

步骤/方式1

蛋白质染色剂的操作方式:

  1.洗涤P***E电泳胶:去离子水洗涤3次,每次约5min。

  电泳结束后,取胶放入约200ml去离子水中,在侧摆或水平摇床上摇动5分钟,弃液体,再重复两次,共洗涤三次。

  注意:本洗涤步骤的目的是为了洗去凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较高。

步骤/方式2

2.染色:加入约30-50ml快速蛋白质染色剂,染色1小时。

  弃去离子水,加入适量的快速蛋白质染色剂(每块大小约8×8厘米的凝胶需使用约30-50ml),使染色液能覆盖凝胶,且液面至少高出三个胶的厚度为宜,室温下在侧摆或水平摇床上进行染色,直至蛋白条带变清晰。

  注意:推荐的室温(20-25℃)染色时间为1小时,实际染色时间可以根据染色效果自行调整,染色至能看到清晰的目标蛋白条带后,弃染色液,加入适量的去离子水,停止染色反应,然后即可拍照记录。延长染色时间,不会增加背景颜色。

步骤/方式3

3.脱色:去离子水至少脱色30分钟(或者过夜)),脱色的P***E胶可于去离子水中保存。

  如果希望获得更加清晰的蛋白条带,可以加入约200ml去离子水室温洗涤约30分钟甚至过夜。通过去离子水洗涤可以进一步降低背景,获得更好的染色效果。